Эффекты прекондиционирования МСК в условиях экспериментальной in vitro модели болезни Альцгеймера

Ключевыми событиями в патогенезе болезни Альцгеймера являются окислительное повреждение нейронов и длительное микроглиальное воспаление. Известно, что кондиционные среды (КС) от мезенхимальных стромальных/стволовых клеток (МСК) обладают нейропротекторным эффектом, благодаря широкому спектру растворенных нейротрофических, антиоксидантных и противовоспалительных факторов. Усилить терапевтический эффект КС можно путем предварительной обработки МСК. Таким образом, целью данной работы было исследование нейропротекторных свойств секретома МСК с активированным TLR3 (прМСК) и предобработанных миметиком гипоксии (гМСК) в условиях экспериментальной in vitro модели болезни Альцгеймера. В работе получены результаты по оценке иммунофенотипа МСК методом проточной цитофлуориметрии, дифференцировочного потенциала с использованием цитохимических реакций и иммуносупрессивных свойств МСК после прекондиционирования (ПЦР-РВ, ИФА). Проведено исследование влияния КС от прМСК и гМСК на нейровоспаление и индуцированное H2O2 нейроповреждение в модели in vitro с использованием ПЦР-РВ, ИФА, МТТ-теста и CM-H2DCFDA-анализа. Впервые показано, что активация TLR3 в МСК способствует более выраженным иммуносупрессивным свойствам КС в отношении провоспалительных М1-макрофагов и может препятствовать развитию нейровоспаления за счет поддержания баланса между М1/М2 типами микроглии. Этот процесс реализуется благодаря снижению секреции провоспалительных цитокинов (IL-1β, IL-6, TNF-α) и увеличению IL-4, IL-10 и TGF-β макрофагами. При этом, для гМСК впервые выявлено усиление нейротрофических свойств, в результате чего применение КС от гМСК приводило к снижению уровня апоптоза, индуцируемого окислительным стрессом в нейроподобных клетках PC12. Такие результаты связаны с увеличением продукции ростовых факторов (в том числе, VEGF). Кроме того, в данной работе впервые показано, что прекондиционирование МСК с poly(I:C) или миметиком гипоксии CoCl2 приводит к усилению нейропротекторных свойств КС в условиях in vitro модели болезни Альцгеймера, путем увеличения экспрессии BCL2, активации пути Nrf2/ARE и продукции IL-6. Таким образом, полученные в данной работе результаты представляют интерес для дальнейшего развития терапии болезни Альцгеймера с использованием кондиционных сред от МСК.